実験室レベルの高速結晶化スクリーニング

渡邉信久

図 1: Hydra96 改造結晶化装置

結晶化条件の初期スクリーニングを 96穴の結晶化プレートを用いて行なうため のツール等をまとめてみました．あくまで，「うちで使用している」というだけ で，どこかの宣伝をするつもりは無いのですが．．．価格も参考まで．．．

うちでは，Hydra 96 を改造した結晶化装置(図1)を使用しており， その場合は約3分程度で 96 条件のセットアップができます．しかし，そこまで やらなくても，8連のピペッターをうまく使えば，慣れてくれば 15分くらいでセッ トアップができます．

• 電動ピペット

  RAININ Instrument Co. Ltd. http://www.rainin.net/

  1. シングルチャンネル

     EDP3 with LTS Model E3-10 (10 uL) $430.00

  2. マルチチャンネル
     • EDP3 with LTS 8-channel Model E8-200 (200 uL) $795.00
     • EDP3 with LTS 8-channel Model E8-10 (10 uL) $895.00

• 96穴結晶化プレート
  • Greiner 96 Well Protein Crystallization Plate (609101)

    CrystalQuick Std. Profile Plate (Hampton なら HR3-190) 約 1100円/plate

    http://www.hamptonresearch.com/hrproducts/3190.html

  • Corning 96 Well Crystallization Plate (Hampton なら HR3-271)

    約 1700円/plate

    http://www.hamptonresearch.com/hrproducts/3271.html

  • 3 Inch Wide Crystal Clear Sealing Tape (HR4-506)

    結晶化プレートは電動ピペットの場合，Greiner の平底を使って います．でも，Corning のプレートは水を透過しにくい材質を使 用していたり，結晶化ドロップ作成部の底の形状もきれいです． また，シールもし易いです．(Cartesian MS4000 による半自動結 晶化では Greiner 丸底プレートを使用している．609120; HR3-281)

  なお，現在科研費基盤 B (展開)で，ハンギング・シッティングの両方が 出来，そのままでX線照射して結晶性の確認が可能な結晶化プレートを開 発中です．

  Watanabe, N., Murai, H., and Tanaka, I.: Semi-automatic protein crystallization system that allows in situ observation of X-ray diffraction from crystals in the drop. Acta Cryst. D58, 1527 - 1530 (2002).

  http://castor.sci.hokudai.ac.jp/watanabe/PaperReprint/Acta-d58-1527.pdf

• ストック試薬用

  Hampton では 96のフォーマットに合せた結晶化スクリーニングキットも 販売をしています．でも，そのくらいは普通のキットから手で分注して も良いでしょう．

  • 2 mL Polypropylene Block (MT-4221)

  • Cap Mat for 2 mL Blocks (MT-4421)

    http://www.matrixtechcorp.com/

    たくさんやるなら，この蓋をするのに，

  • Storage mat applicator (Corning-Corstar 3081)

    があると便利ですが，高い(約10万円)です．

ここの物品は全て，私のところで使用しているものですが，初期導入にあたって は，例えば，
A.Villasenor, M.Sha, P.Thana and M.Browner, BioTechniques, 32 (2002) 184-189.
等を参考にしました．